熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過(guò)對這些參數的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化, 從而闡明分子結構與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計的激發(fā)波長(cháng)掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長(cháng)掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描
種類(lèi)
熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡(jiǎn)便、工作曲線(xiàn)線(xiàn)形范圍寬等優(yōu)點(diǎn),可以廣泛應用于生命科學(xué)、醫學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機和無(wú)機化學(xué)等領(lǐng)域。
熒光分光光度計的發(fā)展經(jīng)歷了手控式熒光分光光度計,自動(dòng)記錄式熒光分光光度計,計算機控制式熒光分光光度計三個(gè)階段;熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計,配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計等。
構成
1. 光源:
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)射出強度較大的連續光譜,且在300nm~400nm 范圍內強度幾乎相等,故較常用。
2.激發(fā)單色器:
置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或di一單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。
3.發(fā)射單色器:
置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或di二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
4. 樣品室:
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時(shí),光源與檢測器成直角安排;測量固體時(shí),光源與檢測器成銳角安排。
5. 檢測器:
一般用光電管或光電倍增管作檢測器。可將光信號放大并轉為電信號。